Quantification des cellules B autoréactives sécrétrices d’anticorps chez des patients atteints de pemphigus après traitement par rituximab ou corticoïde

• DOI: 10.1016/j.annder.2017.09.086
• Publication Date: 2017-11-26T00:15:38Z
• Authors: M. Vaillant; F. Caillot; V. Hebert; P. Marie; O. Boyer; P. Joly; S. Calbo
• Keywords: 03 medical and health sciences; 0302 clinical medicine

Introduction Le pemphigus est une maladie auto-immune mediee par des autoanticorps IgG specifiques des desmogleines (DSG) 1 ou 3. Ces anticorps pathogeniques inhibent l’adhesion cellulaire des keratinocytes. Pour comprendre l’effet immunologique du traitement corticoide (CS) ou du rituximab (RTX), nous avons developpe un test ELISPOT pour determiner la frequence de cellules B memoires capables de secreter des anticorps (Antibody Secreting Cell : ASC) specifiques des DSG dans le sang. Materiel et methodes Les lymphocytes sanguins de patients inclus dans l’etude Ritux 3 comparant le RTX et les CS en 1re ligne ont ete utilises, ainsi que les lymphocytes de donneurs sains comme controle negatifs, et 2 autres controles : l’hybridome AK23 specifique de la DSG3 comme controle positif, et l’hybridome specifique de HMGCR, sans rapport avec le pemphigus, comme controle negatif. Le nombre total d’ASC IgG et d’ASC IgG secretant des anticorps anti-DSG a ete determine par ELISPOT apres 72 heures de stimulation avec IL2 et R848 (ligand des TRL 7 et 8) chez les patients en remission complete (RC) ou incomplete (RI) dans le bras CS et le bras RTX. Resultats La sensibilite de detection des ASC specifiques des DSG revelee par les hybridomes etait de 1/105 ASC. Nos resultats montrent que les ASC IgG totaux representaient 0,2–6 % des cellules mononucleaires du sang peripherique (PBMC). Les ASC IgG specifiques de la DSG1 et de la DSG3 etaient detectables au debut de la maladie a des frequences variant de 0–0,58 % des ASC. De facon inattendue, des ASC IgG specifiques de la DSG1 et de la DSG3 etaient egalement detectables chez les malades du bras RTX en RC a des taux variant de 0 a 0,02 % des ASC, qui etaient cependant plus faible que chez les malades en RI (frequence 0 a 0,36 % des ASC). La frequence des ASC IgG DSG1+ et DSG3+ chez les malades du bras CS sera comparee a celle des malades traites par RTX. Aucun ASC specifique des DSG n’a ete detecte chez les donneurs sains. Discussion La sensibilite de cet ELISPOT permet de detecter une faible population ASC specifique de DSG circulant dans le sang. Ces cellules B memoire, capables de produire rapidement des anticorps, semblent jouer un role important dans la physiopathologie du pemphigus puisque leur frequence est augmentee chez les patients en RI. De facon inattendue, elles sont quand meme detectables chez les patients en RC, posant la question des mecanismes de regulation permettant le maintien de la RC malgre la presence persistante de ces cellules effectrices. Conclusion La frequence des ASC specifiques des DSG est plus elevee chez les malades en RI gardant une maladie active que chez les malades en RC et pourraient constituer un marqueur de reponse au traitement.