Profilage des sIgE spécifique à l’aide de la biopuce à allergènes Alex® et Western Blot à partir d’échantillons fécaux d’enfants âgés de 0 à 3 mois
03 medical and health sciences
0302 clinical medicine
DOI:
10.1016/j.reval.2021.03.193
Publication Date:
2021-05-11T12:25:38Z
AUTHORS (6)
ABSTRACT
Introduction L’avenement des biopuces a allergenes a facilite la description de profils de sensibilisation complexes chez les enfants allergiques. Le faible volume necessaire pour une exploration par biopuce facilite l’analyse des prelevements locaux. L’objectif de ce travail etait de developper un protocole experimental pour detecter des IgE specifiques (sIgE) a l’aide de biopuces a allergenes a partir d’echantillons de matieres fecales et d’evaluer sa valeur predictive pour la survenue de maladies allergiques. Methodes L’analyse a ete realisee sur 21 echantillons de selles collectes entre la naissance et l’âge de 14 semaines chez des nourrissons inclus dans le protocole Primibiota ( NCT02738411 ). La survenue d’allergies alimentaires, asthme, ou dermatite atopique (DA) a l’âge de 1 an a ete consignee dans le cadre du suivi de cohorte. Nous avons developpe et optimise un protocole d’extraction de selles, suivi de lyophilisation et solubilisation. L’exploration de la reponse sIgE a ete realisee par biopuce Alex® (MADX, Vienne, Autriche) et confirmee par Western Blot capillaire avec nano-immunoessai (JessTM Simple Western system, Protein Simple, San Jose, CA). La composante eosinophilique locale a ete exploree par mesure de la concentration d’EDN (Eosinophil-Derived Neurotoxin) par la methode ImmunoCAP (Thermo Fisher Scientific, Uppsala, Suede). Resultats La presence de sIgE a ete detectee dans tous les echantillons testes. Par ordre de frequence, les principales sIgE detectees concernaient des extraits et allergenes alimentaires d’origine animale (21/21) et vegetale (20/21), des pollens (19/21) et des phaneres (15/21). La presence de sIgE a ete confirmee par Western blot JessTM pour les proteines du lait de vache. Quantitativement, la concentration d’EDN fecale et de sIgE etaient significativement differentes chez les nourrissons qui developperaient par la suite une maladie atopique. Conclusion L’exploration de la reponse sIgE et eosinophilique peut etre realisee de maniere non invasive dans les selles chez le nourrisson. Nos resultats suggerent une valeur predictive de ce type d’exploration pour la survenue d’asthme, allergies alimentaires ou DA.
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