Étude de la relation entre le suppresseur de tumeur FHIT et la protéine CFTR dans l’épithélium respiratoire humain sain

• DOI: 10.1016/j.rmr.2021.02.037
• Publication Date: 2021-06-08T14:39:19Z
• Authors: A. Hoarau; J. Beck; M. Polette; B. Nawrocki-Raby; E. Luczka; C. Coraux
• Keywords: FHIT

Introduction La Mucoviscidose (CF) est une maladie genetique rare a transmission autosomique recessive due a des mutations du gene cftr codant pour le canal chlore AMPc-dependant de faible conductance CFTR (Cystic Fibrosis Transmembrane conductance Regulator). Ce canal est egalement implique dans la plasticite cellulaire, notamment la differenciation. Le gene suppresseur de tumeur fhit (Fragile Histidine Triad) est egalement implique dans la plasticite epitheliale, en particulier dans le controle de la transition epithelio-mesenchymateuse (TEM) au cours de la progression tumorale. FHIT est detecte au pole apical des cellules ciliees bronchiques, une localisation egalement partagee par le canal CFTR. Nous nous sommes interesses aux relations physiques et fonctionnelles potentielles existant entre ces deux proteines au sein de l’epithelium des voies aeriennes humaines. Materiels et methodes Nous avons detecte CFTR et FHIT par immunohistochimie sur des coupes bronchiques humaines afin d’observer une co-localisation potentielle. Apres avoir caracterise l’expression de ces deux proteines par les lignees cellulaires NuLi-1, MM39 et S9, ainsi que par les cellules epitheliales de polypes nasaux sains, des siRNAs specifiques de CFTR et de FHIT ont ete utilises pour etudier leur eventuelle co-regulation. Enfin, nous avons utilise la technique overlay ainsi que la technique de resonance plasmonique de surface afin d’observer une interaction physique directe potentielle CFTR-FHIT. Resultats L’etude par immunohistochimie des coupes bronchiques humaines a revele que CFTR et FHIT presentaient une co-localisation partielle au niveau de la membrane apicale de l’epithelium respiratoire. La diminution d’expression de FHIT par l’utilisation de siRNAs specifiques entraine une augmentation de l’expression de la proteine CFTR, alors que le niveau de transcrits CFTR n’est pas significativement modifie. La technique overlay nous a permis d’observer une interaction directe entre CFTR et FHIT mais cette derniere n’a pas pu etre confirmee par la technique de resonance plasmonique de surface. Conclusion Nos resultats montrent une co-localisation partielle de CFTR et FHIT au niveau de l’epithelium bronchique humain, sur des lignees cellulaire NuLi-1 et MM39 ainsi que sur des polypes nasaux sains. Nous avons demontre par la technique d’interference a ARN, que les proteines CFTR et FHIT ont un lien fonctionnel bien qu’une interaction directe reste a etre confirmee.