Desarrollo de una plataforma molecular para la detección y cuantificación del virus vacunal de Newcastle
Newcastle Disease
DOI:
10.15381/rivep.v29i2.14523
Publication Date:
2018-06-01T12:46:58Z
AUTHORS (10)
ABSTRACT
El estudio tuvo por objetivo desarrollar una plataforma molecular para la cuantificación del virus de enfermedad Newcastle (NDV) a partir un sistema cultivo en huevos embrionados SPF. Primero se evaluaron cuatro pares cebadores que amplifican diferentes regiones genoma viral NDV codifican proteína nucleocápside (NP), matriz (M), fusión (F) y ARN polimerasa dependiente (L), con finalidad seleccionar el más conservado cual desarrolló basada transcripción reversa - reacción cadena convencional (RT-PCRc) dos pasos detección NDV. Posteriormente, esta fue llevada tiempo real (RT-qPCR) producido embrionados. Mediante estas técnicas determinó los gen M fueron adecuados según criterios optimización desarrollo ambos métodos. ensayos sensibilidad demostró RT-qPCR (116 copias genómicas/μl) era 10 veces sensible RT-PCRc. Los específicos pues no hubo amplificados controles negativos ni otros patógenos aviares (virus laringotraqueitis infecciosa, metapneumovirus aviar, bronquitis Avibacterium paragallinarum, Gallibacterium anatis Ornithobacterium rhinotracheale). Debido su especificidad, propone vacunal cuando es embrionados, como alternativa frente métodos convencionales titulación hemaglutinación, ensayo placa, TCDI50 DIEP50.
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